Согласно летописи Ново-Никольскую слободу Осинского городища основали в 1591 году на башкирских землях братья Нечай и Филипп Калуженины как один из опорных пунктов Русского государства на его восточной окраине.
Музей находится на месте бывшего Осинского городища (II в. до н.э. — III в. н.э.). Здание музея — памятник истории и архитектуры, бывший Собор Успения Пресвятой Богородицы, построенный на средства прихожан в 1792 — 1824 гг.